Descrição dos produtos
X-Gal (CAS 7240-90-6) é um substrato cromogênico para -galactosidase. Sob a catálise da -galactosidase, produzirá um produto azul. Com base nesta característica, quando o DNA do vetor da série pUC é transformado em células deficientes em lacZ como hospedeiro, ou quando o DNA do vetor do fago M13 é transfectado, se X-Gal e IPTG forem adicionados ao meio de cultura, devido à complementação de -galactosidase, os genes recombinantes podem ser convenientemente selecionados observando se apresentam uma cor branca através do plaqueamento.
É comumente usado para detecção de coloração in situ de -galactosidase e triagem azul-branca.
Especificação de produtos
| Nome do produto | X-Gal/BCIG/5-Bromo-4-cloro-3-indolil-beta-D-galactosídeo |
| Nº CAS | 7240-90-6 |
| ITEM NÃO | M796 |
| Aparência | Pó branco a amarelo claro |
| Pureza | >99% |
| Ponto de fusão | 220–226 graus |
| Pacote | 10 mg/25 mg/500 mg etc. |
| Entrega | 5-8 dias |
| Armazenar | -20 graus |
| MSDS/COA/TDS | Conecte-nos |
Aplicação de produtos X-Gal (CAS 7240-90-6)
1. Clonagem molecular: triagem azul-branca de E. coli, identificação rápida de clones recombinantes positivos.
2. Experimentos com gene repórter: rastreamento do gene lacZ, coloração in situ de seções de células e tecidos.
3. Bioquímica e histoquímica: imuno-histoquímica, ensaio de dois híbridos em leveduras, detecção de fagos.
4. Desenvolvimento de reagentes: Matérias-primas para kits de pesquisa, substratos de desenvolvimento de cores para detecção microbiana.
-galactosidase é a enzima central do sistema genético repórter lacZ e seus substratos também incluem:
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CAS 369-07-3 |
ONPG |
Substrato cromogênico, comprimento de onda de detecção em 420 nm, aplicado para pesquisa de operon lac e ensaio de atividade enzimática. |
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CAS 3150-24-1 |
PNPG |
Substrato cromogênico, comprimento de onda de detecção de 405 nm, compatível com a maioria dos leitores de microplacas e mais utilizado em diagnóstico clínico que o ONPG. |
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CAS6160-78-7 |
MU-Gal |
Substrato fluorescente para -galactosidase, para detecção de alta sensibilidade. |
Perguntas frequentes
Q1: Qual é o princípio do X-Gal para triagem azul-branca?
Re: Vetores sem inserção expressam -galactosidase e ficam azuis. A inserção interrompe o lacZ, nenhuma enzima ativa, as colônias permanecem brancas para triagem positiva.
Q2: O X-Gal poderia ser dissolvido diretamente na água?
Re:É insolúvel em água. Dissolva primeiro em DMSO ou DMF e depois adicione ao meio ou buffer.
Q3: Além da triagem azul-branca, para quais outros ensaios lacZ ele pode ser usado?
Re: Coloração in-situ de células e seções de tecido, dois híbridos de levedura, IHC, rastreamento de repórter em modelos animais transgênicos.
Q4: Por que armazenar a -20 graus protegido da luz? Ele falhará em temperatura ambiente?
Re: É sensível à luz e ao calor, fácil de degradar e causar alto fundo. Armazenamento de longo prazo: -20 graus escuro. Envio de curto prazo com bolsa de gelo é aceitável.
P5: O IPTG deve ser adicionado ao X-Gal para triagem azul-branca?
Re: Sim. IPTG induz expressão de lacZ, utilizado em conjunto com X-Gal em placas de ágar.
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